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ELISA法具有靈敏度高✘₪✘✘、特異性強✘₪✘✘、重複性好的特點│↟，並具有操作簡便✘₪✘✘、無放射性危害的優點│↟，但在測定中常會出現一些誤差和問題◕·。我們通過幾年的實驗觀察│↟，認為影響結果的因素有如下方面◕·。 1✘₪✘✘、 試驗儀器 （1）加樣器是否經過校正│↟，酶免測定血清用血量很少│↟，如手工加樣器的效能不好│↟，吸取樣品不精確│↟，會使結果忽高忽低◕·。 （2）每次洗板前│↟，應檢查洗板機針孔有無堵塞◕·。
2✘₪✘✘、試劑盒 （1）抗原✘₪✘✘、抗體活性對效價的影響▩•·▩：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價降低或失活│↟，結果不易判斷◕·。再有ELISA法靈敏度高│↟，對雜質的反應靈敏度也高│↟，實驗中空白對照OD值偏高或假陽性◕·。
（2）酶結合物濃度過高│↟，也會導致OD值假性增高◕·。 3✘₪✘✘、 操作 （1）檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min後使用│↟，試劑用完及時放回冰箱冷藏│↟，以免造成試驗結果假性降低◕·。 （2）加樣時注意勿觸及包被板底部│↟，以免擦傷包被物使抗體（抗原）脫落而影響實驗結果的準確性◕·。 （3）洗滌不充分│↟，會使結果假性增高│↟，過分洗滌呈假陰性◕·。 （4）比色時應保持包被孔底部無異物✘₪✘✘、無水汽│↟，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時│↟，底部留有水汽│↟，應將板底擦乾後進行比色│↟，水汽或孔內氣泡也會使OD值升高◕·。 （5）抗原與抗體反應達到完全平衡│↟，依賴於溫度與時間◕·。溫度高於45℃易引起失活及標記物脫落│↟，溫度低於4℃│↟，影響反應速度◕·。總之│↟，由於ELISA實驗的影響因素較多│↟，在實際工作中必須操作規範✘₪✘✘、仔細│↟，避免和排除各種因素的影響│↟，使之得到準確可靠的檢驗結果◕·。
