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PCR引物的必要性│▩·☁：
1↟·││☁、 pcr技術的基本原理類似於dna的自然複製過程☁▩◕✘▩，其特異性依賴於靶序列兩端互補的寡核苷酸引物↟₪。
2↟·││☁、pcr是一種體外dna擴增技術☁▩◕✘▩，它依賴於dna聚合酶在模板dna↟·││☁、引物和四種脫氧核苷酸存在下的酶促反應↟₪。待擴增的DNA片段及其兩側互補的寡核苷酸鏈引物透過“高溫變性-低溫退火-引物延伸”三步反覆迴圈☁▩◕✘▩，使DNA片段的數量成倍增加☁▩◕✘▩，因此在短時間內☁▩◕✘▩，我們需要大量的特異性基因片段↟₪。
3↟·││☁、dna聚合酶無法從頭合成與模板鏈匹配的新鏈☁▩◕✘▩，只能在模板鏈上以一段短小（一般幾bp至十幾bp不等）但與模板鏈配對緊密的鏈作為起始鏈☁▩◕✘▩，沿5->3方向合成新鏈☁▩◕✘▩，這個過程我們稱之為“延伸”↟₪。
4↟·││☁、起始鏈的合成在真核細胞體內是由rna聚合酶（對就是轉錄時用的那個）代勞的☁▩◕✘▩，此酶具有從頭合成鏈的能力（即“起始”能力）之後dna合酶以這段短的rna鏈為起始☁▩◕✘▩，不斷延伸合成新鏈↟₪。這段短rna鏈起到了“引發”新鏈合成的功能☁▩◕✘▩，因此也被稱作“引物”↟₪。在原核生物中☁▩◕✘▩，dna分子以環狀形式存在☁▩◕✘▩，隨便切個口就可以以切口3端作為起始開始延伸了 （當然人家細菌還是有操守的☁▩◕✘▩，為了切得方便還是門設定了一個複製起始位點）↟₪。
5↟·││☁、在dna新鏈延伸完畢後☁▩◕✘▩，真核細胞需要將作為起始鏈的rna鏈替換為dna☁▩◕✘▩，這個過程依據位置不同在細胞裡大致有兩種處理方式│▩·☁：如果引物在dna鏈一端☁▩◕✘▩，別說了直接上端粒合酶吧；若引物位於dna鏈中間☁▩◕✘▩，則是由同樣具有dna延伸活性（但速度比述的dna合酶慢許多）併兼具5->3方向水解能力（這樣才能把引物rna鏈切掉）的另一種dna合酶代勞☁▩◕✘▩，後用dna連線酶將替換鏈和新鏈之間的小缺口填補上↟₪。原核生物等低等生物中由於有滾環複製θ複製等特殊機制存在☁▩◕✘▩，複製流程的細節上會有差異☁▩◕✘▩，並且會多一步切割並環化dna分子的步驟☁▩◕✘▩，不過總體機制大同小異↟₪。
可見☁▩◕✘▩，在生物體內的dna複製過程是複雜的☁▩◕✘▩，需要多種酶先後參與進來☁▩◕✘▩，並且對於dna的延伸來說☁▩◕✘▩，引物是必不可少的↟₪。
6↟·││☁、在體外的pcr體系中☁▩◕✘▩，由於│▩·☁：
①出於成本考量☁▩◕✘▩，暫時沒有發現並最佳化在pcr工作溫度（55°C－－95°C+）下仍具有很好活性的rna合酶↟·││☁、dna合酶（替換引物用）↟·││☁、dna連結酶↟₪。
②出於現有工藝考量☁▩◕✘▩，從頭合成設計好的dna短引物是相對簡單快捷的技術☁▩◕✘▩，並且可以省略引物的替換步驟↟₪。
因此使用短dna作為引物是必要且高效的選擇↟₪。
